本科生畢業論文紫色論文
㈠ 大學畢業論文字數要求
大學畢業論文的字數要求因學校、學茄指科和專業而異,一般都會在畢業論文指導書或者規定中明確規定。以下是一些常見學位的畢業論文字數標准范圍,僅供參考:
1. 本科生:本科論文一般在6000~10000字之間,有些學校可能會要求不超過8000字,也有部分學校會有更高的要求。
2. 碩士研究生:碩士論文一般在3萬~5萬字之間,但是不同學科、不同專業和不同學校的要求可能會有所不同,有些還會在指導書上明確規定。
3. 博士研究生:則納碰博士論文一般在5萬~10萬字之間,同樣也會因不同學科、不同專業和不同學校而有所不同,一些學科的博士論孫談文可能會有更高的字數要求。
需要注意的是,論文字數的要求不是絕對的標准,重要的是能夠充分反映研究的深度和廣度,同時也取決於具體的論文研究內容和寫作風格。因此,在撰寫論文時,應該注重論文的質量和深度,而不是過分拘泥於字數的約束。
㈡ 標准本科生畢業論文排版格式
標准本科生畢業論文排版格式
本科生畢業論文排版格式如下文
一、紙張和頁面要求
紙型為A4,上下頁邊距為2.54cm、左邊距為3.0cm、右邊距為2.6cm、正文行距為固定值23磅。單面列印。
二、論文裝訂頁碼順序
1、封面(學校統一下發)
2、題名頁
3、中文摘要、關鍵詞
4、英文摘要、關鍵詞
5、目錄(要求至少有二個層次,註明頁碼)
6、論文正文
7、結論
8、參考文獻
9、致謝
以上9項分別從新頁開始。
三、章節目序號 按照正式出版物的`慣例,章節編號方法應採用分級數字編號方法,按三級標題編寫:
1 ……
1.1 ……
1.1.1 ……
如三級標題後面要繼續編目,請按下列標號進行:
(1) ……
1) ……
① ……
四、排版格式
1、學校下發的封面,一律用黑水筆正楷填寫或列印。
2、題名頁見樣張一:
(1)題目用二號黑體,居中,單倍行距。題目上空4行,下空10行,空行均為三號,單倍行距。
(2)專業、學生姓名、指導教師姓名及提交時間用三號黑體,單倍行距,上下對齊。
(3)此頁不加頁眉,不加頁碼。
3、論文中文摘要見樣張二:
(1)題目用三號黑體,居中,單倍行距。題目上下各空一行,空行均為三號,單倍行距。
(2)居左列印“摘要” 二字(四號黑體,不加粗)。
(3)“摘要”後面空兩格列印摘要內容(小四號宋體)。
(4)摘要內容後下空一行居左列印“關鍵詞”三字(四號黑體,不加粗),其後空兩格為關鍵詞(小四號宋體),每一關鍵詞之間用逗號隔開,最後一個關鍵詞後不打標點符號。
(4)此頁加頁眉,不加頁碼。
4、英文摘要見樣張三:
(1)題目用三號Times New Roman字體,居中,單倍行距。題目上下各空一行,空行均為三號,單倍行距。
(2)居左列印“ABSTRACT” (四號Times New Roman,加粗),“ABSTRACT”後空兩格列印英文摘要內容(小四號Times New Roman,不加粗)。
(3)摘要內容第二段開始每段開頭留四個空字元。
(4)摘要內容後下一行為“KEY WORDS” (四號Times New Roman,加粗),其後空兩格為關鍵詞用小寫字母(小四號Times New Roman,不加粗),每一關鍵詞之間用逗號隔開,最後一個關鍵詞後不打標點符號,關鍵詞全部小寫。
(5)此頁加頁眉,不加頁碼。
5、目錄格式見樣張四。
(1)“目錄”二字為小二號黑體,居中列印;上下各空一行(二號,單倍行距),目錄下的各章節標題為章、節、小節及其開始頁碼(小四宋體)。
(2)章節編號,用分級阿拉伯數字編號方法,即第一級為1、2、3等,第二級為2.1、2.2、2.3等,第三級為2.2.1、2.2.2、 2.2.3。第一級標題頂頭編排,第二級標題分別比上一級空2格開始編排,第三級標題分別比上一級再空2格開始編排。對齊方式為分散對齊。
(3)目錄頁加頁眉
(4)單獨編排頁碼:阿拉伯數字,居中,小五號宋體。
6、正文格式要求見樣張五:
字體:所有一級標題均採用三號黑題(不加粗),居中,上下各空一行;
所有二、三級標題均採用小四號黑體(不加粗),靠左對齊,首行縮進2個字元;二級標題前空一行,二級標題後不空行;三級標題前後均不空行。
所有正文均採用小四號宋體,靠左對齊,首行縮進2個字元,行距均為固定值23磅。
;㈢ 本科論文一般要寫多少字
本科生畢業論文一般要多少字?
不同的學校對於本科畢業論文的字數要求不同,一般非211、985學校的本科畢業論文字數在6000字——8000字左右,一些要求較高的專業或者重點院校則要求論文字數高達10000字左右或者以上。
論文各部分字數的大致要求:
1、文獻綜述
字數在1000字——3000字之間。文獻綜述是在確定了選題後,在對選題所涉及的研究領域的文獻進行廣泛閱讀和理解的基礎上,對該研究領域的研究現狀、新水平、新動態、新技術和新發現、發展前景等內容進行綜合分析、歸納整理和評述。
2、正文
字數要求在6000字以上,原則上不超過10000字。正文是畢業論文的主體內容,是整篇論文的核心所在,占論文的絕大部分篇幅。包括引言、正文、結論或結束語三大部分。
3、標題
一般不超過20個漢字。畢業論文題目應簡明扼要,避免過寬、過大、過空,要能准確反映論文的實質性主題內容,包括研究的范圍、層次和深度等。
4、摘要
論文的中文摘要應以最簡潔的語言介紹論文的概要、作者的突出論點和新見解。學士學位論文中文摘要一般不少於200字。
5、關鍵詞
一般為3——5個。關鍵詞根據論文正文內容及論文主題選取。英文關鍵詞要與中文關鍵詞一一對應。
6、致謝
一般不超過300字。致謝可以對下列方面表達謝意:協助完成研究工作和提供便利條件的組織或個人;在研究工作中提出建議和提供幫助的人;給予轉載和引用權的資料、圖片、文獻、研究思想和設想的所有者;其他應感謝的組織或個人。
㈣ 本科生畢業論文標准格式
本科生畢業論文標准格式模板
一:標准論文格式
1、題目。應能概括整個論文最重要的內容,言簡意賅,引人注目,一般不宜超過20個字。
論文摘要和關鍵詞。
2、論文摘要應闡述學位論文的主要觀點。說明本論文的目的、研究方法、成果和結論。盡可能保留原論文的基本信息,突出論文的創造性成果和新見解。而不應是各章節標題的簡單羅列。摘要以500字左右為宜。
關鍵詞是能反映論文主旨最關鍵的詞句,一般3-5個。
3、目錄。既是論文的提綱,也是論文組成部分的小標題,應標注相應頁碼。
4、引言(或序言)。內容應包括本研究領域的國內外現狀,本論文所要解決的問題及這項研究工作在經濟建設、科技進步和社會發展等方面的理論意義與實用價值。
5、正文。是畢業論文的主體。
6、結論。論文結論要求明確、精煉、完整,應闡明自己的`創造性成果或新見解,以及在本領域的意義。
7、參考文獻和注釋。按論文中所引用文獻或注釋編號的順序列在論文正文之後,參考文獻之前。圖表或數據必須註明來源和出處。
(參考文獻是期刊時,書寫格式為:
[編號]、作者、文章題目、期刊名(外文可縮寫)、年份、卷號、期數、頁碼。
參考文獻是圖書時,書寫格式為:
[編號]、作者、書名、出版單位、年份、版次、頁碼。)
8、附錄。包括放在正文內過份冗長的公式推導,以備他人閱讀方便所需的輔助性數學工具、重復性數據圖表、論文使用的符號意義、單位縮寫、程序全文及有關說明等。
二:本科畢業論文格式要求:
1、裝訂順序:目錄--內容提要--正文--參考文獻--寫作過程情況表--指導教師評議表
參考文獻應另起一頁。
紙張型號:A4紙。A4 210×297毫米
論文份數:一式三份。
其他(調查報告、學習心得):一律要求列印。
2、論文的封面由學校統一提供。(或聽老師的安排)
3、論文格式的字體:各類標題(包括“參考文獻”標題)用粗宋體;作者姓名、指導教師姓名、摘要、關鍵詞、圖表名、參考文獻內容用楷體;正文、圖表、頁眉、頁腳中的文字用宋體;英文用Times New Roman字體。
4、字體要求:
(1)論文標題2號黑體加粗、居中。
(2)論文副標題小2號字,緊挨正標題下居中,文字前加破折號。
(3)填寫姓名、專業、學號等項目時用3號楷體。
(4)內容提要3號黑體,居中上下各空一行,內容為小4號楷體。
(5)關鍵詞4號黑體,內容為小4號黑體。
(6)目錄另起頁,3號黑體,內容為小4號仿宋,並列出頁碼。
(7)正文文字另起頁,論文標題用3號黑體,正文文字一般用小4 號宋體,每段首起空兩個格,單倍行距。
(8)正文文中標題
一級標題:標題序號為“一、”, 4號黑體,獨占行,末尾不加標點符號。
二級標題:標題序號為“(一)”與正文字型大小相同,獨占行,末尾不加標點符號。
三級標題:標題序號為“ 1. ”與正文字型大小、字體相同。
四級標題:標題序號為“(1)”與正文字型大小、字體相同。
五級標題:標題序號為“ ① ”與正文字型大小、字體相同。
(9)注釋:4號黑體,內容為5號宋體。
(10)附錄: 4號黑體,內容為5號宋體。
(11)參考文獻:另起頁,4號黑體,內容為5號宋體。
(12)頁眉用小五號字體列印“上海復旦大學XX學院2007級XX專業學年論文”字樣,並左對齊。
5、 紙型及頁邊距:A4紙(297mm×210mm)。
6、頁邊距:天頭(上)20mm,地角(下)15mm,訂口(左)25mm,翻口(右)20mm。
7、裝訂要求:先將目錄、內容摘要、正文、參考文獻、寫作過程情況表、指導教師評議表等裝訂好,然後套裝在學校統一印製的論文封面之內(用膠水粘貼,訂書釘不能露在封面外)。
1.紙張與頁面設置
(1)A4,縱向;
(2)頁邊距:上1.0cm,下2cm,左側2.5cm,右側2cm
2.頁眉
(1)設置:1.4cm
(2)字體:統一使用漢語:小五號宋體。
(3)分割線:3磅雙線;
(4)內容:××學院本科期末論文,居中。
3.頁腳
內容:頁碼,居中。
4.論文基本內容與要求
(1)論文題目:單獨成行,居中,日語:小2號黑體;英語:Times New Roman 18號;
(2)作者姓名:另起一行,居中,日語:小4號宋體;英語:Times New Roman 12號;
(3)內容提要:另起一行,日語:4號黑體,內容為小4號黑體,長度要求150字以上;英語:Times New Roman 12號,長度要求在100字左右;
(4)關鍵詞:另起一行,日語:4號黑體,3-5個關鍵詞,每個關鍵詞之間用“;”分割,內容為小4號黑體;英語Times New Roman 12號;
(5)正文
正文部分的要求如下:①正文部分與“關鍵詞”行間空兩行;②日語正文文字採用小四號宋體;英語正文文字採用Times New Roman 12號,標題日語採用四號黑體,英語採用Times New Roman 14號,每段首起空兩格,1.25倍行距;③段落間層次要分明,題號使用要規范。理工類專業畢業設計,可以結合實際情況確定具體的序號與層次要求;④文字要求:文字通順,語言流暢,無錯別字,無違反政治上的原則問題與言論,要採用計算機列印文稿;⑤圖表要求:所有圖表、線路圖、流程圖、程序框圖、示意圖等不準用徒手圖,必須按國家規定的工作要求採用計算機或手工繪圖,圖表中的文字日語用小五號宋體;英語採用Times New Roman 10.5號;圖表編號要連續,如圖1、圖2等,表1、表2等;圖的編號放在圖的下方,表的編號放在表的上方,表的左右兩邊不能有邊;⑥字數要求:一般不少於1500(按老師要求);⑦學年論文引用的觀點、數據等要註明出處,一律採用章節附註。
㈤ 本科生畢業論文格式標准
本科生畢業論文格式標准如下:
一、字體
1.中文題目與摘要
題目:小二號黑體,加粗,居中,段前、段後1.5行。
摘要:三號宋體,不加粗,居中。
摘要正文:四號宋體,首行空兩個字,1.5倍行距,若內容過多,可適當減少行距,以美觀為主,限一頁。
關鍵詞:四號宋體,首行空兩字,標題加粗,具體關鍵詞不加粗,使用分號隔開。
2.英文題目與摘要
題目:小二號Times New Roman字體,居中,加粗,段前、段後1.5行。
摘要:三號Times New Roman字體,不加粗,居中。
摘要正文:小四號Times New Roman字體,1.5倍行距,首行空兩個字元,按照英文規范格式書寫,若內容過多,可適當減少行距,以美觀為主,限一頁。
Keywords:四號Times New Roman字體,左空兩個字元,標題加粗,英文關鍵詞不加粗,使用分號隔開。
(備註:行距可根據具體篇幅做適當調整,限一頁,以美觀為主。)

三、論文(設計)編排結構(裝訂成冊)
第一頁:封面(封面顏色每個學院應相對統一)
第二頁:誠信承諾書及版權授權說明
第三頁:中文摘要(後附中文關鍵字)
第四頁:英文摘要(後附英文關鍵字)
第五頁:目錄(標明各章節所在的頁碼)
後續頁:依次為論文正文、注釋和參考文獻、附錄(如程序、文檔、數據、圖紙)、致謝、學習期間發表的學術論文目錄等。
封底:同封面紙質,無任何內容。
四、論文版式要求(分頁設計)
㈥ 畜牧獸醫本科生畢業論文
隨著時代的不斷變化與發展,我國傳統的畜牧行業展開了相應的改革,我國的畜牧獸醫行業也有了進一步的提升。下文是我為大家整理的關於畜牧獸醫本科生畢業論文下載的範文,歡迎大家閱讀參考!
畜牧獸醫本科生畢業論文下載篇1
淺析豬常見傳染性疾病臨床症狀和預防治療方法
1 豬副傷寒病
本病主要侵害 1~4 月齡仔豬,一年四季均可發生,但陰雨潮濕季節多發。病豬和帶菌豬是主要傳染源,可從糞、尿、乳汁、流產的胎兒、胎衣、羊水排菌,主要經消化道感染。在子宮內也可能感染。健康豬帶菌相當普遍,當受外界不良因素影響以及抵抗力下降時,常導致內源性感染。主要特徵是腹瀉、下痢,若不及時准確治療,很快就脫水死亡,死亡率高,經濟損失大。
1.1 豬副傷寒病的症狀
急性型:多發生於斷乳前後的仔豬,常突然死亡。病程稍長,體溫高達 41℃~42℃,腹瀉,下痢,呼吸困難,耳根、胸前、腹下皮膚有紫斑,多以死亡告終。
亞急性和慢性型:表現體溫升高,眼結膜發炎,有膿性分泌物。初便秘後腹瀉,排灰白色或黃綠色惡臭糞便。病豬消瘦,皮膚有痂狀濕疹。病程可達數周,最終死亡或僵豬。
1.2 防治措施
預防:加強防疫注射或投喂副傷寒苗。把好豬源關,自繁自養極佳。改善飼管及衛生條件,消除發病誘因,增強仔豬抵抗力。常洗用具、食槽,保持圈舍清潔、乾燥,不留糞尿,以減少感染機會。
哺乳及培育仔豬防止舔食臟物,喂優質、易消化飼料,勿突然更換飼料。
治療:肌注恩諾沙星、鹽酸環丙沙星,服土黴素片;肌注氯黴素、慶大黴素,服土黴素片;肌注氯黴素、磺胺嘧啶鈉,服土黴素片;肌注恩諾沙星、氯黴素,服土黴素片;鹽酸環丙沙星、氯黴素,服土黴素片。
2 豬肺疫病
豬肺疫是多殺性巴氏桿菌感染引起的一種急性、敗血性傳染病,各齡豬均可感染發病,其特徵是急性病例呈敗血症死亡。本病對多種動物和人均有致病性,豬最易感,季節性不明顯,以冷熱交替,氣候劇變,高溫,潮濕,多雨季節多發。營養不良、長途運輸、飼養條件不良等因素促進本病發生, 一般呈散發性或地方性流行。
2.1 豬肺疫的症狀
急性病例高熱達 41℃~42℃,呼吸困難,犬坐姿勢,咳喘,口鼻流泡沫或清液,咽喉部急性腫大、紅色、觸診堅硬有熱痛感。腹側、四肢內側皮膚發紅斑,指壓褪色,終呼吸困難窒息而死;慢性病例主要呈現慢性肺炎、慢性胃腸炎症狀,鼻流膿性分泌物,持續性咳嗽、呼吸困難,食慾不振,伴腹瀉消瘦。
2.2 防治措施
預防:定期注射豬肺疫苗;把好豬源關;豬舍定期消毒,保持乾燥、衛生、通風;發現病例及時隔離治療。
治療:靜注磺胺嘧啶鈉。肌注長效土黴素、恩諾沙星或卡那黴素,若並發它病要對症治療。
3 豬傳染性胸膜肺炎
病原是胸膜肺炎放線桿菌,各齡豬均易感,多發於 6 周齡至6 月齡豬。長途運輸、飼管不當、氣候驟變等因素可引發本病。病豬和帶菌豬為主要傳染源,主要經呼吸道氣流感染。
3.1 豬傳染性胸膜肺炎的症狀
感染豬潛伏期 1~7 天。按病程長短分最急性型、急性型、亞急性型和慢性型。最急性型病豬突然死亡,死前無徵兆,死豬腹部、耳、四肢發紺,口鼻流帶血紅色泡沫,死亡率高達 80%~100%。急性型病豬減食或廢絕,體溫 41℃左右,常站立或呈犬坐姿勢不卧,精神沉鬱,耳鼻、四肢皮膚呈藍紫色,張口伸舌,喘,間歇性咳嗽,呼吸困難,表情極痛苦,常於 24 小時內病重窒息死亡,部分轉為亞急性或慢性。亞急性型或慢性型病豬體溫正常或稍高,咳喘,食慾減退,消瘦,病程延長或進一步惡化。
3.2 防治方法
預防:加強防疫,定期注射胸膜肺炎多價滅活苗;嚴把豬源關;強化飼養管理;嚴格消毒制度,保持圈舍清潔、乾燥、通風;實行全進全出的飼養方式,發現病豬及時隔離治療。
治療:本病早期治療效果較好,用葯量要大。首選靜注磺胺嘧啶鈉,肌注長效土黴素、恩諾沙星或(卡那黴素、丁胺卡那黴素)。
可同時使用維 C、地米效果會更好。若並發其他病要對症治療。
4 豬口蹄疫
口蹄疫屬於一種急性、烈性的傳染病,豬、牛、羊等偶蹄動物均易感染,本病傳染性很強,無明顯季節性,一年四季均可發生。以流涎,跛行,口腔、鼻盤、蹄部水皰為主要特徵。
4.1 豬口蹄疫的症狀
患病豬體溫升高,全身症狀明顯,流涎,跛行,喜卧,鼻盤、口腔、齒齦、舌、乳房(主要是哺乳母豬),蹄冠、蹄叉、蹄踵均會產生水皰,皰潰後、流膿血而形成爛斑,重者蹄殼脫落,病仔豬可因停食、腸炎腹瀉等死亡。
4.2 防治方法
若發現豬患上口蹄疫,一定要上報動物檢疫部門,不能隱瞞、出售、私屠亂宰;對病死豬要作焚燒、深埋等無害化處理;對圈舍、用具、槽子等進行嚴格的清洗消毒,以免口蹄疫經空氣、污物、病肉等傳播,傳染給其他家畜甚至人。該病危害極大,無法根治,只能預防。因此預防十分關鍵,廣大養殖戶要十分重視,定期注射口蹄疫苗,切勿心存僥幸,造成重大經濟損失。
5 豬丹毒病
該病是由豬丹毒桿菌引起豬的一種傳染病。多發生在夏秋和梅雨季節,2 月齡以上豬最易感染。病豬潛伏期短的為 3~5 天,長的達半月之久。主要特徵是在耳後、頸部、胸、腹側等部位,皮膚出現各種形狀紅斑或疹塊,呼吸困難,病死率很高,對養豬業危害很大。
5.1 豬丹毒病的症狀
該病分為敗血型、疹塊型和慢性型。患豬體溫升高,精神不振,食慾減退或廢絕,口渴,大便乾燥。在耳根、胸、背部、腹部、大腿上均出現形狀不一、大小不一、界限明顯、扁平腫脹的紫紅色疹塊,指按褪色。
5.2 防治措施
預防:定期預防注射豬丹毒苗。強化消毒制度,搞好圈舍衛生。嚴把豬源關,新購進的豬應隔離飼養一周,確定正常後再入圈喂養。
治療:靜注磺胺嘧啶鈉,用復方氨基比林或安乃近 10~20 毫升稀釋青黴素肌注,每天 2 次;中葯療法可用大黃、石膏、玄參、知母、連翹、地龍各 25 克,甘草 15 克,加水煎服 2 劑。
畜牧獸醫本科生畢業論文下載篇2
淺談奶牛乳腺炎治療新策略研究進展
乳腺炎(mastitis)是奶牛最常見的生產性疾病,給奶牛業造成了巨大的經濟損失[1].奶牛乳腺炎分臨床型和隱性乳腺炎兩種,臨床型乳腺炎以乳房紅腫熱痛、乳腺組織損傷為主要特徵[2],而隱性乳腺炎雖無可見臨床症狀,但在大部分牛場存在,危害更大。奶牛罹患乳腺炎後,引起乳腺上皮細胞合成和分泌功能不同程度障礙,乳脂肪、乳蛋白和乳糖等主要乳成分合成量明顯減少[3],造成牛奶品質顯著下降。研究證實,綜合評估各種因素造成的損失,奶產量及奶品質下降造成的損失占總損失的49%[1].
國內常見的奶牛乳腺炎治療方法是使用抗生素,但由於乳腺炎病原菌種類多,乳腺感染致病機制復雜,其治療效果不理想。長時間大劑量使用抗生素極易導致耐葯菌株增多、乳中抗生素殘留等問題,嚴重威脅乳品及生命安全。因此,開發能快速修復乳腺組織,恢復產奶量、提高奶品質的治療方法迫在眉睫。
研究表明,乳酸鏈球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板濃縮液新型乳腺炎治療制劑可用於奶牛乳腺炎臨床治療。另外,激素、調控乳腺細胞信號通路及嗜中性粒細胞數量等新型治療策略也為快速高效防治乳腺炎提供了良好前景。
1治療乳腺炎的新制劑
1.1乳酸鏈球菌素
乳酸鏈球菌素 (Nisin)又稱乳球菌肽或乳鏈菌肽,是從乳酸鏈球菌發酵物中提取的一種多肽抗菌類物質,已被證明是一種安全天然生物性食品防腐劑和抗菌劑[4].Nisin最先作為牛乳房乳頭的一種消毒劑使用,具有良好的殺菌作用且無潛在組織損傷。Nisin作為乳腺炎治療葯物的主要作用機理是其吸附於細胞膜上以後,破壞細胞膜的完整性,引起細胞裂解及細胞內蛋白大量外泄,致病原菌死亡[5].
另外的研究也證實,Nisin在肺炎鏈球菌感染小鼠模型的治療中,也起到良好的殺菌作用。從臨床型奶牛乳腺炎分離出金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和無乳鏈球菌的葯敏試驗結果可見,Nisin能夠有效抑制這兩種細菌的生長和繁殖[4].曹立亭等[6]使用Nisin乳腺灌注治療臨床型乳腺炎,測定治療前後牛奶中乳脂肪含量、非脂乳固體含量、牛奶蛋白質含量、奶牛泌乳性能等指標,治療後奶牛所產牛乳的上述指標均顯著提高,提示使用Nisin可促進乳腺上皮細胞合成乳成分的能力增強及乳腺組織修復。Szweda P等[7]分離出37株牛乳腺炎源耐葯菌株,葯敏結果顯示其中21株S.aureus對Nisin敏感,進一步證明Nisin具有良好的殺菌作用。
1.2 Aegis溶菌酶
Aegis溶菌酶是一種有效的抗菌劑,能切斷肽聚糖中N-乙醯葡萄糖胺和N-乙醯胞壁酸之間的β-l,4糖苷鍵,破壞肽聚糖支架,在內部滲透壓的作用下致細胞脹裂,引起細菌裂解[8].通過對比溶菌酶和頭孢唑啉鈉治療臨床型乳腺炎的治療效果試驗,溶菌酶組給葯24h後乳清中丙二醛(malondialde-hyde,MDA)含量顯著降低,揭示溶菌酶能抑制和清除炎症時產生的氧自由基,從而減少對乳腺細胞的損傷[9].進一步研究證實,雞蛋清溶菌酶、鴨蛋清溶菌酶、10%溶菌酶制劑、細菌性溶菌酶對引起奶牛乳腺炎的葡萄球菌均有抑製作用[10],細菌性溶菌酶治療效果最好,最有希望用來治療細菌性乳房炎。
沈誠等[11]將人溶菌酶重組質粒pcDNAKLYZ乳腺灌注治療隱性乳腺炎奶牛,比較灌注前後牛乳中的細菌陰性率,灌注前陰性率為0,灌注後陰性率為51.92%,顯示重組質粒抑菌效果顯著,該重組質粒對奶牛隱性乳腺炎具有較好的治療效果。
1.3溶葡萄球菌酶
溶葡萄球菌酶(lysostaphin)是一種從模仿葡萄球菌(S.simulans)中分離獲得的含Zn2+內切肽酶,因能有效的清除金黃色葡萄球菌生物被膜而達到殺菌作用[12].Aguinaga A等[13]使用溶葡萄球菌酶和不同抗生素單獨和聯合使用對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)和甲氧西林敏感菌(methicillin-susceptible S.aureus,MSSA)的研究報告中顯示,溶葡球菌酶跟抗生素聯合使用比單獨使用抗生素,具有較強的殺菌作用並且致MSSA及MRSA菌株的抗生素使用濃度分別降低了2倍~11倍和2倍~14倍。在另一研究中,用MRSA建立小鼠肺炎模型,分別應用不同劑量的溶葡萄球菌酶、萬古黴素和PBS進行感染後治療,結果顯示溶葡萄球菌組具有低病死率、肺組織損傷減少、感 染 部 位 細 菌 數 較 少 特 征,並 成 劑 量 依 賴性[14].
Szweda P等[7]研究同時也指出耐葯菌對溶葡球菌酶的最小抑菌濃度(minimal inhibitory con-centration,MIC)為0.008μg/mL~0.5μg/mL,遠遠小於MIC最大值32μg/mL,且所有耐葯菌對溶葡萄球菌酶敏感。蔣司嘉等[15]使用低、中、高重組溶葡球菌酶粉治療85頭患乳房炎奶牛的104個乳區,試驗結果表明低中高劑量重組溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳區的鏈球菌、葡萄球菌、化膿隱秘桿菌等革蘭陽性菌,大幅降低牛奶中的白細胞數,提高日產奶量。不同劑量的重組溶葡萄球菌酶治療隱性乳房炎、臨床型乳房炎的有效率和治癒率都優於青黴素,治療效果跟劑量呈正相關。
1.4 CpG-DNA
CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序為核心的DNA序列,它包括含CpG基序的人工合成的CpG-ODN和自然界中低等生物的基因組DNA[16].在由大腸埃希菌建立的山羊乳腺炎模型中,試驗組乳腺組織中大腸埃希菌數顯著低於對照組,CpG-ODN對大腸埃希菌誘導山羊乳腺炎的乳腺有保護作用[17].在分別由金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌誘導的大鼠乳腺炎中,使用CpG-DNA的試驗組乳腺組織白細胞介素-6(in-terleukine-6,IL-6)、腫瘤壞死因子-ɑ(tumor necro-sis factor-ɑ,TNF-ɑ)和CpG-DNA特 異 性 受 體TLR-9(Toll-like receptor-9)mRNA表達水平較對照組顯著提高,同時減輕炎症反應和炎症介質對組織的損傷,提示CpG-DNA具有乳腺保護作用,其作用機理可能為CpG-DNA與宿主體內天然免疫細胞上的模 式 識 別 受 體 相 結 合,引 起 相 應 的 免 疫 應答[18].
1.5血小板濃縮液
血小板最常見的作用是在血管損傷部位聚集,形成凝血酶原和纖維蛋白原組成凝血表面從而達到止血作用[19].Pinto J M等[20]通過使用血小板濃縮液治療一例人慢性皮膚潰瘍,觀察到肉芽組織增生,提示治療有效,可能原因是血小板作為生長因子的載體刺激膠原蛋白產生、活化成纖維細胞和誘導細胞外基質重塑達到修復組織損傷作用。
Lange-Con-siglio A等[21]使用血小板濃縮液灌注感染乳腺,通過感染乳腺乳汁體細胞數和細菌數評估治療效果,結果顯示使用血小板濃縮液能顯著降低牛乳中體細胞數和細菌數,血小板濃縮液在促進炎症消散、減少乳腺實質損傷、降低乳腺炎復發率方面有較好作用。進一步研究證實血小板濃縮液不僅對乳腺組織有修復作用,對奶牛乳腺炎病原菌也有抑製作用。
Bi-elecki T M等[22]採用Kirby-Baue紙片擴散法,觀察到人富含血小板的血漿的瓊脂平板可以顯著抑制金黃色 葡 萄 球 菌 及 大 腸 埃 希 菌 的 生 長。
Marian E等[23]從事的另一項研究不僅驗證了上述研究結果,而且顯示血小板濃縮液對銅綠假單胞菌也有抑製作用。一項乳腺炎流行病學調查的研究顯示,金黃色葡萄球菌乳腺炎發病率為16.3%,大腸埃希菌乳腺炎發病率引起的為25.2%[24],因此有望使用血小板濃縮液治療由條件致病菌引起的乳腺炎。
2乳腺炎治療新策略研究進展
2.1激素調控乳腺細胞的分泌及修復
激素在生殖生理方面應用廣泛,乳腺的生長發育和分泌功能均在大腦皮層和丘腦下部的調節下進行,多種內分泌激素發揮著重要作用[25-26].佟慧麗等[27]建立正常培養的奶山羊乳腺上皮細胞系,用催乳素處理體外培養乳腺上皮細胞,測定催乳素處理組乳腺上皮細胞乳糖和總蛋白水平,顯示催乳素誘導乳腺上皮細胞乳糖及乳蛋白分泌水平明顯升高。
陳建暉等[28]使用催乳素和孕酮處理奶牛乳腺上皮細胞系,測定處理後細胞中的酪蛋白和乳糖含量,顯示催乳素處理組升高趨勢顯著,提示催乳素可以提高乳腺幹細胞的數量。激素已被證實有助於提高乳腺細胞分泌能力,提高牛乳品質,促進乳腺組織恢復,但應用方法及其作用機制有待進一步研究。
2.2調控乳腺細胞凋亡及相關信號通路的研究
研究證實乳腺炎的發生發展與乳腺細胞的凋亡及信號通路關系密切,肖陽[29]使用TUNNEL方法檢測奶牛不同發育時期乳腺組織的細胞凋亡,證實泌乳晚期凋亡信號最強。乳腺細胞的分化、更新及凋亡與信號通路的調控聯系緊密,與此相關的信號通路包括Wnt信號通路、Notch信號通路、Hedge-hog信號通路[26].Wnt信號通路中,β-catenin可以啟動Wnt靶基因的表達;抑制β-catenin信號,乳腺細胞分化和增殖被抑制,Notch信號通路的激活能夠促進乳腺細胞的自我更新,而Notch的過量表達會抑制細胞的分化。研究表明不同形式的TP63激活Hedgehog信號通路可促進乳腺細胞的有絲分裂[30].張雯[31]使用脂多糖(LPS)誘導的原代小鼠乳腺上皮細胞炎症模型,檢測LPS刺激下細胞因子和炎性介質的分泌以及常見的兩條炎症信號轉導通路NF-κB和MAPK的變化,結果顯示LPS刺激下,乳腺上皮細胞TRL4、NF-κB和下游細胞因子表達升高,顯著抑制了p38、JNK和ERK、MAPKs磷酸化。分析各信號通路在乳腺細胞分化更新及凋亡中的機制,精細調控乳腺細胞凋亡也有望成為治療乳腺炎的新方向。
2.3調控乳腺組織嗜中性粒細胞數量的研究
金黃色葡萄球菌(S.aureus)等致病菌侵入奶牛乳腺後,中性粒細胞向感染乳腺組織集中,發揮吞噬功能清除病原,充當保護機體的第一道防線[32].然而,如果PMN在炎症灶過度激活或延遲清除,大量PMN可以通過釋放氧自由基等有害內容物加重炎症反應,使炎症遷延、慢性化或擴散至全身[33].因此適時適度清除PMN對於控制乳腺炎症的發展和轉歸至關重要。
Wang Y等[34]使用650nm,2.5mW,30mW/cm2低強度激光療法作用LPS誘導的大鼠乳腺炎模型,經低強度激光療法後,抑制PMN向乳腺腺泡聚集,降低髓過氧化物酶活性,從而減輕乳腺炎症反應。另一項研究證實,日糧中硒含量與乳腺中PMN數量直接相關,LPS誘導的小鼠乳腺炎的病理學切片顯示,缺硒小鼠乳腺出現較多PMN浸潤、乳腺中組織中促炎因子表達水平高於正常硒含量組小鼠,因此有望通過調控日糧中硒含量,調節乳腺中PMN數量,進而防治奶牛乳腺炎[32].
綜上所述,乳腺炎是一種嚴重危害奶牛業的疾病,抗生素治療乳腺炎由於其天然局限性,治療效果並不理想。乳腺炎防治新制劑乳酸鏈球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板濃縮液有望替代傳統治療葯物;激素療法、調控信號通路及PMN數量有望作為預防治療乳腺炎的新策略。積極開展牛乳腺炎治療新制劑及新策略的研究,為高效防控奶牛乳腺炎提供良好條件。
參考文獻:
[1]Sinha M K,Thombare N N,Mondal B.Subclinical mastitis indairy animals:incidence,economics,and predisposing factors[J].Sci World J,2014:523984.doi:10.1155/2014/523984.
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