南昌大學羅達亞教授

❶ 口腔拭子DNA提取步驟包括哪些

鹽析法快速提取口腔拭子DNA

朱偉鋒 羅達亞 塗碩 張霞麗 揭克敏 萬福生

【摘要】：目的建立鹽析法快速從口腔拭子
中提取基因組DNA的方法。方法首先以細胞裂解液和蛋白酶K消化口腔上皮細胞,然後用5 mol/L
NaCl沉澱蛋白質,用異丙醇沉澱DNA,最後用70%乙醇洗滌得到的DNA並將其溶於TE(10mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L
EDTA,pH
8.0)中。用聚合酶鏈反應-限制性片段長度多態性(PCR-RFLP)技術對TP53基因的rs1042522和CHRNA3基因的
rs12910984位點進行分型。對不同基因型的樣本測序驗證。結果單支口腔拭子提取得到的DNA量在0.68～2.56μg之間,D260/D280
比值在1.77～1.94之間。經PCR擴增和酶切消化,10個樣本的兩個單核苷酸多態性都得到了清楚分型。酶切結果與測序結果吻合。結論本實驗所建立的
鹽析法可以快速、簡便、經濟地從口腔拭子得到高質量的基因組DNA。

【作者單位】：
南昌大學醫學院生物化學與分子生物學教研室;